免疫膠體金技術的基本知識接下來膠體金廠家來為大家介紹一下免疫膠體金技術的基本知識: 一、免疫膠體金技術基本知識 1、膠體金這個概念 氯金酸(HAuCl4)在氧化劑影響下,可匯聚成一定大小的小金顆粒,產生帶負電荷的疏水膠水溶液。因為靜電引力成為相對穩定的膠體狀態,故名膠體金。 2、免疫金標記技術 膠體金顆粒物表面負電與蛋白質的正電官能團因靜電力而產生堅固融合。膠體金對蛋白質有極強的吸附功能,蛋白質等高分子材料被吸附到膠體金顆粒物表面,無化學鍵產生,標識后大分子蛋白質活力不發生變化。 3、膠體金的示蹤劑原理 金顆粒具有較高的電荷密度的特點。金標蛋白質在相應的配位處大量聚集時,在顯微鏡下由此可見深褐色顆粒或可觀測紅色或淡粉色色斑。 免疫黃金白銀上色:運用金顆粒可催化反應納米銀轉變成金屬銀這一原理,根據銀顆粒堆積,在電鏡下由此可見抗原抗體反應的呈陽性位置展現銀的深褐色。 二、膠體金制取需要注意的事項 (1)玻璃器皿清潔:玻璃器皿應肯定清理,用前酸洗鈍化、鋁硅酸鹽。 (2)實驗試劑、水體:試驗自來水一般用雙蒸水。緩沖溶液有足夠的緩沖容量,濃度值不可太高以防金膠體溶液自凝。 三、免疫膠體金的制取 1、制取膠體金標識蛋白質應注意的問題 (1)蛋白質的預備處理。蛋白質先要對低電離度水分析,清除酸鹽成份。用微孔濾膜或超速離心去掉蛋白質溶液中的細微顆粒。 (2)低含鹽量的緩沖溶液。過多鹽可讓金顆粒產生凝結。 (3)PH接近蛋白質等電點或略偏堿性。蛋白質所在融解情況比較適合偶聯反應,蛋白質分子結構在金顆粒表面的吸附容量較大。 (4)蛋白質最可用量挑選:可以使膠體金相對穩定的適宜蛋白量加上10%即是最好標識蛋白量。 (5)膠體金與蛋白質偶聯反應后,添加增稠劑,以避免發生凝結。一般選用PEG和牛血清白蛋白作增稠劑。 以上就是膠體金廠家為大家介紹的文章,希望能夠幫助到大家! |